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Eine Einführung in den Lateral Flow Test: Stärken, Einschränkungen und Anwendungen

Aug 01, 2023Aug 01, 2023

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Diagnostische Tests sind in vielen Bereichen von entscheidender Bedeutung, darunter im Gesundheitswesen und in der Präventivmedizin, Lebensmittelsicherheit und Umweltüberwachung. Daher benötigen Analysten geeignete und genaue Tests, die auf den Probentyp, den Analyten und die Testumgebung abgestimmt sind und die finanziellen, zeitlichen und betreiberbezogenen Einschränkungen berücksichtigen. Ein solcher Test, um diese Nische zu füllen, ist der Lateral Flow Test (LFT). In diesem Artikel betrachten wir, was LFTs sind, wie sie funktionieren und welche Anwendungen sie haben.

Was ist ein Lateral Flow Test (LFT)?

Was sind alternative gebräuchliche Namen für einen Lateral-Flow-Test?

Wie funktioniert ein Lateral-Flow-Immunoassay (LFIA)?

So lesen Sie ein Lateral-Flow-Gerät (LFD) aus

Überlegungen zum Design von Lateral-Flow-Tests

- Art des Lateral-Flow-Tests

- Antikörper

- Etikettentyp und entsprechendes Erkennungssystem

- Musterblock

- Konjugat-Pad

- Membran

- Saugfähige Unterlage

- Probe

- Multiplexing

Stärken und Schwächen von Lateral-Flow-Assays

Häufige Anwendungen für einen Lateral-Flow-Assay (LFA) und ihre Ziele

- Schwangerschaftstestziel

- Ziel-COVID-Test zu Hause

- Menschliche Krankheitserreger

- Tierische Krankheitserreger

- Lebensmittelverunreinigungen

- Umweltschadstoffe

- Allergene

- Therapeutika, die einer engmaschigen Überwachung bedürfen

- Drogenmissbrauch

Ein Lateral-Flow-Test (LFT) ist ein einfacher, schneller und kostengünstiger Test, der das Vorhandensein von Zielantigenen oder Antikörpern in einer flüssigen Probe nachweisen kann.1 Als eine Art Immunoassay beruht der Nachweis auf der Bindung von Antikörpern mit ihrem Zielantigen kombiniert mit einer Nachweisreaktion, um ein lesbares, oft sichtbares Ergebnis zu liefern.

Für LFTs werden mehrere Begriffe und Abkürzungen verwendet, von denen einige austauschbar sind, je nachdem, ob es sich um das Testverfahren oder das verwendete Gerät handelt und ob der Test Antigene oder Antikörper nachweist. Allgemeine Begriffe sind in der folgenden Tabelle 1 zusammengefasst.

Tabelle 1: Namen und Abkürzungen zur Beschreibung von LFTs.

Begriff

Abkürzung

Kommentare

Lateral-Flow-Test

LFT

Kann sich auf den Testprozess oder das physische Gerät beziehen

Lateral-Flow-Assay

LFA

Kann sich auf den Testprozess oder das physische Gerät beziehen

Lateral-Flow-Immunoassay

LFIA

Kann sich auf den Testprozess oder das physische Gerät beziehen

Immunchromatographischer Lateral-Flow-Assay

LFIA

Kann sich auf den Testprozess oder das physische Gerät beziehen

Lateral-Flow-Gerät

LFD

Bezieht sich auf das physische Testgerät

Immunchromatographischer Teststreifen

-

Bezieht sich auf das physische Testgerät

Antigentest

-

Kann sich auf jeden Test beziehen, der Antigene nachweist, wie zum Beispiel den Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), schließt aber auch LFTs ein

Antikörpertest

-

Kann sich auf jeden Test beziehen, der Antikörper nachweist, wie z. B. den ELISA, schließt aber auch LFTs ein

Schnelltest

-

Obwohl dieser Begriff technisch gesehen nicht ausschließlich ein LFT ist und auch andere Testmodalitäten umfassen könnte, wird er häufig als Bezeichnung für einen LFT verwendet

Schneller Antigentest

RAT oder KUNST

Wird normalerweise als LFT bezeichnet, der Zielantigene nachweist

Schneller Antikörpertest

RAT oder KUNST

Wird normalerweise als LFT bezeichnet, der Zielantikörper nachweist

LFTs sind typischerweise in einem Kunststoffgehäuse mit einer Vertiefung zur Probeneinführung und einem Fenster untergebracht, durch das die Test- und Kontrollleitungen sichtbar sind.

Die Durchführung einer direkten LFT läuft wie folgt ab (Abbildung 1):

Beispiele für die Bindungsreaktionen, die bei direkten LFTs zum Nachweis eines Antigens oder eines Antikörpers auftreten, sind in den Abbildungen 2 bzw. 3 dargestellt.

Da die meisten Tests ein sichtbares Ergebnis liefern, bei dem sich Linien dort bilden, wo das Konjugat mit oder ohne Ziel eingefangen wird, können viele LFTs mit dem bloßen Auge abgelesen werden. Erfolgreiche Tests mit Direkttests werden durch das Vorhandensein der Kontrolllinie angezeigt und ein positives oder negatives Ergebnis wird durch das Vorhandensein oder Fehlen der Testlinie angezeigt (Abbildung 4). Eine andere Form des LFT, der Wettbewerbstest (wird im nächsten Abschnitt besprochen), erfordert eine andere Interpretation der Ergebnisse. Obwohl dieser Test nicht häufig in der breiten Öffentlichkeit eingesetzt wird, ist es wichtig, festzustellen, welche Art von Test Sie bewerten.

Es ist wichtig zu beachten, dass die Ergebnisse nur innerhalb des für den jeweiligen Test festgelegten Zeitrahmens interpretiert werden sollten. Wenn sie zu früh nach dem Einbringen der Probe abgelesen werden, hatte das Ergebnis möglicherweise keine Zeit, sich vollständig zu entwickeln. Wenn die Probe zu lange nach der Probeneinführung belassen wird, können sich die Banden im Laufe der Zeit verändern, wenn die Reaktion nachlässt oder sich zu stark entwickelt.

Einige Tests können auch digital mit einem Hand- oder Tischscanner oder einem Smartphone ausgelesen werden. Die ersten Handscanner kamen in den 2000er Jahren auf den Markt.4 Für Tests, die ein fluoreszierendes statt kolorimetrisches Ergebnis liefern, ist ein Lesegerät in irgendeiner Form erforderlich. Während Handheld-Geräte und Smartphone-Systeme in der Regel jeweils einen Test lesen, können Tischgeräte LFD-Chargen gleichzeitig lesen, sind jedoch im Gegensatz zu ihren tragbaren Gegenstücken normalerweise auf Laboreinstellungen beschränkt. Der Einsatz dieser Geräte kann die Unsicherheit menschlicher Fehler beim Ablesen, Interpretieren und gegebenenfalls Aufzeichnen von Ergebnissen beseitigen. Einige Leser messen auch die Intensität der Testlinien, um ein quantitatives Ergebnis zu erhalten. Digitale Messungen können besonders nützlich sein, wenn die Linien auf dem LFD schwach sind und eine digitale Aufzeichnung der Testergebnisse bei Problemen mit der Datenintegrität und Rückverfolgbarkeit hilfreich sein kann. Sie bieten auch Möglichkeiten, Daten für die Patientenüberwachung durch Ärzte zu sammeln, was möglicherweise zu frühzeitigen Interventionen und besseren Gesundheitsergebnissen führt.

Während Tisch- und Handlesegeräte für den Heimgebrauch normalerweise nicht praktisch oder erschwinglich sind, haben Smartphone-Lesegeräte diese Lücke geschlossen. Frühe Formulare fanden keine breite Anwendung, da zusätzliche kundenspezifische Add-ons5, 6, 7 erforderlich waren, damit das Telefon die Ergebnisse erfassen konnte. Fortschritte in der Test- und Telefontechnologie sowie eine verbesserte Konnektivität haben diese Situation jedoch verbessert. Während der COVID-19-Pandemie wurden digitale Lesegeräte zur Verwendung zugelassen, bei denen Benutzer über eine App auf ihrem Telefon ein Foto des LFT übermittelten und künstliche Intelligenz zur Interpretation des Ergebnisses eingesetzt wurde. Die Macher hoffen, dass die App breiter für andere LFD-basierte Tests eingesetzt werden kann. Da die Nachfrage nach quantitativen Point-of-Care- und Point-of-Use-Tests weiter steigt und Sensortechnologien sich weiter verbessern und in Größe und Kosten sinken, ist es wahrscheinlich, dass wir in diesem Bereich weiterhin neue technologische Entwicklungen erleben werden.8

Tests können so konzipiert sein, dass sie mehrere Ziele in einem einzigen Durchgang erkennen, was als Multiplexing bezeichnet wird (weiter im nächsten Abschnitt besprochen).9 In diesen Fällen können die Ergebnisse für jedes Ziel als eine einzelne gemeinsame Kontrolllinie mit jeweils aufeinanderfolgenden Testlinien dargestellt werden Dies zeigt an, ob die Probe für das entsprechende Ziel positiv oder negativ ist (Abbildung 5 A). Das gleiche Prinzip kann auch zur Erstellung eines Array-Formats angewendet werden, bei dem mehrere Teststreifen, jeweils für ein einzelnes Ziel und mit ihren eigenen Kontrolllinien, parallel laufen gelassen werden und die Ergebnisse von jedem Streifen abgelesen werden (Abbildung 5 B).

Alternativ können Systeme verwendet werden, die mehrere Markierungen verwenden, jede für ein anderes Ziel in einer einzelnen Probe, die voneinander unterschieden werden können, wie beispielsweise fluoreszierende Markierungen mit unterschiedlichen Emissionsprofilen (Abbildung 6 A). Dieser Ansatz erfordert Fachleser. Wenn es wünschenswert ist, eine ganze Klasse eines bestimmten Ziels nachzuweisen, anstatt das spezifische Ziel zu differenzieren (z. B. mehrere Antigene auf einem bestimmten Krankheitserreger oder mehrere Formen desselben Krankheitserregers), kann ein breit selektiver Antikörper verwendet werden, der das Vorhandensein erkennt einer Reihe von Molekülen in einer bestimmten Klasse, sondern melden es als einzelnes undifferenziertes Ergebnis (Abbildung 6B).

Wie bei den meisten Immunoassays gibt es bei der Entwicklung eines LFT oder der Übertragung eines laborbasierten Tests auf einen LFD eine Reihe wichtiger Überlegungen und es ist wichtig, alle Testkomponenten sorgfältig auszuwählen und zu optimieren. Diese beinhalten:

Bei den meisten LFTs, auf die wir stoßen werden, und in der Tat auf den oben beschriebenen Typ, handelt es sich um direkte Assays. LFTs können jedoch im direkten (Sandwich) oder kompetitiven (Hemmung) Format vorliegen. Direkttests werden typischerweise beim Testen auf größere Analyten mit mehreren Antigenstellen verwendet, wie zum Beispiel beim menschlichen Schwangerschaftstest für humane Choriongonadotropine (hCG). Hier muss das Konjugat im Überschuss vorhanden sein, um sicherzustellen, dass es zusammen mit dem Ziel nicht vollständig an der Testlinie eingefangen wird und daran gehindert wird, die Kontrolllinie zu erreichen.

Kompetitive Formate werden typischerweise beim Testen auf kleine Moleküle mit einzelnen antigenen Determinanten verwendet, die nicht in der Lage sind, zwei Antikörper gleichzeitig zu binden. Im Gegensatz zu direkten Tests wird ein positives Ergebnis durch das Fehlen einer Testlinie angezeigt, während in allen Fällen immer noch eine Kontrolllinie erscheinen sollte. Dies liegt daran, dass das Konjugat bereits an gereinigte Zielantigene gebunden ist und nur dann, wenn Zielantigene in der Probe vorhanden sind, das Konjugat abgespalten und daran gehindert wird, sich an die Testlinie zu binden und dort ein Ergebnis zu erzielen (Abbildung 7).

Monoklonale Antikörper binden ein einzelnes Epitop ihres Ziels und bieten so eine gute Spezifität. Die Verwendung polyklonaler Antikörper kann die Empfindlichkeit erhöhen, da sie im Gegensatz zu monoklonalen Antikörpern mehrere Epitope des Ziels binden, jedoch das Risiko einer erhöhten unspezifischen Bindung und damit einer Verringerung der Spezifität bergen. Unabhängig davon, ob monoklonale oder polyklonale Antikörper verwendet werden, muss jeder Antikörper für einen bestimmten Test validiert und optimiert werden, einschließlich der verwendeten Menge, um genaue und empfindliche Ergebnisse zu gewährleisten.

Optische Anzeigen werden am häufigsten in LFTs verwendet und können in kolorimetrische und fluoreszierende Gruppen unterteilt werden. Die Wahl der entsprechenden Konjugatmarkierung richtet sich danach, wie der Test gelesen werden soll, wo und von wem. Zu den am häufigsten verwendeten Markierungen in kolorimetrischen Tests gehören kolloidales Gold, Nanopartikel, Zellulose und Polymerkügelchen, während zu den fluoreszierenden Markierungen fluoreszierende Kügelchen10 und Quantenpunkte gehören.11

Das Probenpad1 muss in der Lage sein, die Probe aufzunehmen und in einer mit dem LFD kompatiblen Form abzugeben. Daher muss es ausreichend saugfähig sein und gleichzeitig über auf den jeweiligen Probentyp abgestimmte Eigenschaften verfügen. Dies kann bedeuten, dass rote Blutkörperchen oder Partikel herausgefiltert, der pH-Wert geändert oder Matrixkomponenten zerstört werden müssen, was durch eine entsprechende Vorbehandlung des Pads erreicht werden kann.

Das Konjugatpad1 muss in der Lage sein, das Konjugat während der gesamten Lebensdauer des LFD festzuhalten und stabil zu halten und es bei Verwendung des LFD effizient und zuverlässig abzugeben. Schlechte oder ungleichmäßige Trocknung und Freisetzung können wichtige Ursachen für Schwankungen in der Testleistung sein. Daher ist es wichtig, dass Material, Beschichtung und Trocknungsprozess beim Beladen des Konjugatpads optimiert werden. Wichtig ist auch, dass das gewählte Material den Probenfluss nicht behindert.

Die Membran1 muss in der Lage sein, dass Probe/Puffer und Konjugat gleichmäßig durch sie fließen können und gleichzeitig die Immunreagenzien während der gesamten Lebensdauer des LFD stabil an den Test- und Kontrolllinien halten. Es darf auch nicht die Bindungsreaktionen oder die gewählte Nachweismethode beeinträchtigen. Nitrozellulose ist ein beliebtes Material; andere wurden versucht, aber im Allgemeinen mit wenig Erfolg.

Das Volumen, das die Membran aufnehmen kann, ist endlich und daher ist es die Aufgabe des absorbierenden Kissens1, die Probenmenge und damit das Ziel (falls vorhanden) zu erhöhen, das durch die Membran über die Testlinie gelangt, wodurch die Testempfindlichkeit und -spezifität verbessert wird. Dies wird dadurch erreicht, dass die Probe (und ggf. der Puffer) beim Erreichen aufgesaugt wird, wodurch mehr Flüssigkeit durch die Membran geleitet wird. Das absorbierende Pad muss über ein Bettvolumen verfügen, das größer ist als das der zu untersuchenden Probe/des Puffers, um das überschüssige Volumen halten zu können, bis das Ergebnis abgelesen werden kann, ohne dass es zu einem potenziell störenden Rückfluss kommt. Daher ist es wichtig, die richtige Dicke, Dichte, Festigkeit und das richtige Material zu wählen. Zellulose ist aufgrund seiner Absorptionsfähigkeit eine beliebte Wahl.

Die Probe selbst ist ein wichtiger Aspekt bei einem erfolgreichen LFT. Proben, die sehr viskos sind, dringen möglicherweise nicht durch die Membran ein oder verursachen Verstopfungen, die zu Testfehlern führen können, während inhomogene Proben unzuverlässige Ergebnisse liefern können. Auch die Probenkonzentration ist ein wichtiger Gesichtspunkt. Bei zu großer Verdünnung können positive Ergebnisse übersehen werden, bei zu hoher Konzentration kann es zu Beeinträchtigungen der Testleistung kommen. Daher benötigen einige Probentypen möglicherweise eine Vorbehandlung (z. B. Mukolytika), eine Trennung (z. B. Extraktion von Serum aus Vollblut) oder eine Verdünnung, um sie für LFD-basierte Tests geeignet zu machen und Ergebnisse zu liefern, die innerhalb des dynamischen Bereichs des Tests liegen.

Während der Nachweis eines einzelnen Ziels ausreichen kann, profitieren einige Anwendungen vom Multiplexing, um den Nachweis mehrerer Ziele oder mehrerer Teile desselben Gesamtziels in einem Assay zu ermöglichen. Dadurch entfällt die Notwendigkeit, wiederholte Tests an derselben Probe durchzuführen, was Zeit und Kosten reduziert. Allerdings kann die Integration mehrerer Testreaktionen auf einem einzigen Gerät die Komplexität der Assay-Optimierung erhöhen und es ist wichtig, Kreuzreaktivität oder Interferenzen zwischen den verschiedenen Zielen zu vermeiden. Die räumliche Trennung mehrerer Testlinien ist eine beliebte Methode zum Multiplexen, obwohl sie die Interpretation der Ergebnisse erschweren, mehr Materialien und Proben erfordern und die Zeit bis zum Ergebnis im Vergleich zu einem Einzelziel-Assay verlängern kann. Array-Formate überwinden das Problem der kombinierten Optimierung, Laufzeit und des Lesens eng beieinander liegender Ergebnisse, erfordern aber auch deutlich mehr Materialien und Proben. Multiplexing-Strategien, die differenzierbare Bezeichnungen verwenden, erfordern in der Regel auch, dass spezialisierte Leser die Ergebnisse interpretieren.

Mit LFTs sind zahlreiche Stärken verbunden, die zu ihrer weit verbreiteten Verwendung geführt haben, nicht zuletzt bei Anwendungen wie Schwangerschaftstests und bei der COVID-19-Pandemie. Wie bei den meisten Tests gibt es jedoch Einschränkungen12 für ihre Verwendung, wie unten zusammengefasst.

Stärken

Schwächen

Die Anwendungen für LFTs sind so zahlreich und vielfältig, dass es unmöglich wäre, sie hier alle abzudecken. Nachfolgend finden Sie eine Auswahl der beliebtesten Einsatzgebiete.

Eines der wohl bekanntesten Beispiele für LFT ist der Schwangerschaftstest zu Hause. Es gibt es seit den 1980er Jahren13 und erkennt hCG, das während der Schwangerschaft von der Plazenta produziert wird, im Urin. Die Empfindlichkeit hat im Laufe der Jahre zugenommen und Tests liefern nun typischerweise 10 oder 11 Tage nach der Empfängnis ein positives Ergebnis.

Die meisten Menschen haben wahrscheinlich einen oder mehrere der häuslichen SARS-CoV-2-LFTs14 aus erster Hand erlebt. Die meisten Geräte, die Menschen zu Hause verwenden, dienen dazu, das Vorhandensein des Virus selbst zu testen (z. B. ob sie infektiös sind?), und nicht auf Antikörper, die auf eine Exposition oder Impfung hinweisen. Als solche sind sie darauf ausgerichtet, sich an die exponierten und zugänglichen antigenen Teile des Virus zu binden, wie z. B. die Spike-, Hüll-, Membran- oder Nukleokapsidproteine.15

Obwohl SARS-CoV-2 möglicherweise der menschliche Krankheitserreger ist, der uns zuerst in den Sinn kommt, wenn wir über die Anwendungen von LFTs bei Infektionskrankheiten nachdenken, haben sie sich auch für die Erkennung einer Reihe von Zielen als nützlich erwiesen, darunter die Plasmodium-Parasiten, die Malaria verursachen, Mycobacterium tuberculosis, der Erreger von Tuberkulose,16 dem Hepatitis-B-Virus17 und dem humanen Immundefizienzvirus (HIV).18

Nicht nur die Humanmedizin profitiert von LFTs. Neben Trächtigkeitstests an Tieren können mit diesem Format auch eine Reihe veterinärmedizinischer Krankheitserreger getestet werden. Es ist besonders nützlich für Ärzte, die außerhalb der Klinik arbeiten oder Tests bei Landwirten, Tierhaltern oder Eigentümern durchführen. Dazu gehören die Afrikanische Schweinepest19 und enterische Rindererreger.20 LFT-Tests waren ausschlaggebend für die Ausrottung der Rinderpest.21 Tests in landwirtschaftlichen Betrieben können auch dazu beitragen, zu verhindern, dass Krankheitserreger bei zur Lebensmittelerzeugung genutzten Tieren den Verbraucher erreichen. Es gab jedoch Kritik an der Qualität einiger angebotener Tests für Krankheiten wie Tollwut.22

Lebensmittelverunreinigungen kommen in vielen Formen vor, von Krankheitserregern und Pestiziden bis hin zu Schwermetallen und Toxinen. Ein Beispiel dafür sind Aflatoxine, sekundäre Metaboliten, die von Aspergillus flavus und Aspergillus parasiticus produziert werden und in getreidebasierten Lebensmitteln, Nüssen und Gewürzen vorkommen.23 Sie umfassen eine Gruppe chemisch verwandter Verbindungen, für die zahlreiche LFTs entwickelt wurden, die auf die Toxine abzielen. Aufgrund ihrer geringen Größe haben LFTs für Aflatoxine typischerweise ein indirektes Format. Es wurden auch Multiplex-Tests entwickelt, die auf Aflatoxine und andere Mykotoxine prüfen.24 Salmonellenarten sind weit verbreitete Krankheitserreger in Lebensmitteln, bei denen eine schnelle Diagnose dazu beitragen kann, die Behandlung zu beschleunigen, Kontaminationsquellen zu identifizieren und eine weitere Ausbreitung zu verhindern.25 Die LFT-Technologie bietet ein Mittel dazu Dazu nutzten sie die Phagentechnologie, um wirksame Bindemittel für Teststreifen zu bestimmen26 und sogar lebende von toten Salmonella Enteritidis zu unterscheiden.

Der Nachweis von Umweltschadstoffen, darunter Pestizide, Bisphenol A (BPA) und Schwermetalle, ist wichtig für den Schutz von Mensch, Tier und Umwelt. Mit tragbaren Testlösungen können Analysten vor Ort Probleme erkennen und schnell Maßnahmen ergreifen. Es wurden LFTs entwickelt, die Quecksilber,27 Chrom28 und Cadmium29-Ionen erkennen können. BPS, eine besorgniserregende endokrin wirkende Verbindung, kann mit dieser Technologie ebenfalls nachgewiesen werden und zeigte im Vergleich zu Labortests günstige Ergebnisse.30 Organophosphor-Pestizide können mithilfe indirekter LFTs nachgewiesen werden,31 während ein Test zum gleichzeitigen Nachweis von Carbofuran und Triazophos dient in Wasser wurde ebenfalls entwickelt.32

Allergiker müssen darauf achten, ihre Auslöser zu meiden. Ebenso müssen beispielsweise Lebensmittelhersteller sicherstellen, dass Produkte, die als „frei von“ deklariert sind, dies auch tatsächlich tun. LFTs bieten eine schnelle und einfache Möglichkeit, die Sicherheit der Menschen zu gewährleisten, und wurden für eine ganze Reihe häufiger Allergene entwickelt, darunter Gluten,33 Kasein,34 Soja,35 Senf und verschiedene Nüsse.36

Bei einigen therapeutischen Arzneimitteln besteht ein schmaler Unterschied zwischen einer unwirksamen Dosis, einer optimalen Dosis und einer Überschreitung sicherer Werte, bei denen schwerwiegende Nebenwirkungen auftreten können. Um sicherzustellen, dass die Patienten im optimalen Dosisbereich bleiben, ist eine engmaschige Überwachung erforderlich, und begleitende Diagnostika wie LFTs können dies leisten. Digoxin, ein Herzglykosid zur Behandlung von Tachykardie, ist ein solches Medikament und Wissenschaftler haben einen LFT entwickelt, der mit einer Smartphone-App gelesen werden kann, um die Selbstüberwachung und Dosierung des Patienten zu erleichtern.37

Die Urinanalyse, für die sich LFAs gut eignen, ist nach wie vor eine der häufigsten Testmethoden für illegale Drogen im Vereinigten Königreich und liefert schnelle Ergebnisse für Situationen wie Tests am Arbeitsplatz oder bei der Strafverfolgung. Es wurde auch ein Test für Kokain entwickelt, der im Gegensatz zu Tests für viele Drogen, die aufgrund ihrer geringen Molekülgröße einem kompetitiven Format folgen, ein nicht-kompetitives Format verwendet, indem er ein biomimetisches Material verwendet.38 Es wurden sogar LFAs entwickelt, die nachweisen können Δ9-Tetrahydrocannabinol, Kokain, Opiate und Amphetamin im Schweiß eines Fingerabdrucks.39

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